Анализ крови пцр на гепатит с

Исследование для выявления возбудителя гепатита C (HCV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (РНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HCV, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5×10² – 1,0×10⁸копий/мл образца.

Синонимы русские

Вирус гепатита С (ВГС), количественное определение РНК.

Синонимы английские

Hepatitis C Virus RNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood, HCV Viral Load, Hepatitis C Virus RNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (HCV) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает печень. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Основной путь передачи инфекции – через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.

Острый вирусный гепатит, как правило, характеризуется бессимптомным течением и остается невыявленным в большинстве случаев. Только у 15 % инфицированных заболевание протекает остро – с тошнотой, ломотой в теле, отсутствием аппетита и потерей веса (редко сопровождается желтухой). У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, что в 15 раз превышает частоту хронизации при гепатите В. Хронический вирусный гепатит С протекает с повышением печеночных ферментов и скудным проявлением симптомов. У 20-30 % больных заболевание приводит к циррозу печени, увеличивая риск развития печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы.

Выявление РНК HCV свидетельствует о размножении вируса в организме и является методом диагностики заболевания. Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования – в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.

Посредством ПЦР выявляют РНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни.

Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса. Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени.

Для чего используется исследование?

Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С».
Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
Для мониторинга противовирусной терапии и решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

При качественном обнаружении РНК вируса гепатита С.
При остром и хроническом вирусном гепатите С.
При микст-гепатитах.
При планировании, во время и после окончания противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Не обнаружено – РНК вируса гепатита С не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 400 МЕ/мл).
< 7,5*10^2 копий/мл (<1.5*10^3 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации ниже линейного диапазона концентраций.
< 2*10^6копий/мл (< 4*10^6МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Низкая виремия (наиболее благоприятный прогноз течения заболевания и эффективности терапии).
> 2*10^6 копий/мл (>4*10^6МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена. Высокая виремия.
>1,0*10^8 копий/мл (>2*10^8 МЕ/мл) – РНК вируса гепатита С обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций РНК вируса гепатита С, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (1,5*10^3 – 2*10^8 МЕ/мл).

Что может влиять на результат?

Недостоверный результат может быть получен при:

загрязнении биоматериала;
наличии в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
присутствии в крови гепарина.

Важные замечания

Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
При планировании лечения очень важно определить генотип вируса гепатита С.

Также рекомендуется

Anti-HCV, антитела, ИФА
Аnti-HCV, антитела
Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита
HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]
HCV, генотипирование, РНК [реал-тайм ПЦР]
Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
Фосфатаза щелочная общая
Альбумин в сыворотке
Билирубин общий
Холестерол общий
Тромбиновое время
Фибриноген
Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
Лейкоцитарная формула
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог.

Литература

Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000. – Т.1.: 600-690.
Кишкун А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. — М.:ООО МИА, 2006. – 471-476 с.
Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16^th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.

Lerat H, Rumin S, Habersetzer F, and others. In vivo tropism of hepatitis C virus genomic sequences in hematopoietic cells: influence of viral load, viral genotype, and cell phenotype. Blood. 1998 May 15;91(10):3841-9.PMID:9573022.
Revie D, Salahuddin SZ. Human cell types important for hepatitis C virus replication in vivo and in vitro: old assertions and current evidence. Virol J. 2011 Jul 11;8:346. doi: 10.1186/1743-422X-8-346. PMID:21745397.

www.helix.ru

Что представляет собой исследование

Анализ ПЦР на гепатит С — обследование в условиях лаборатории, выявляющее флавирус – генетический материал вируса рибонуклениновой кислоты (РНК). Оно определяет количество молекул РНК в крови, качество биологического материала, генетический тип флавируса HCV.

Метод ПЦР при гепатите С позволяет обнаружить минимальное количество флавируса еще до формирования антител, как правило, вскоре после инфицирования.

Исследование часто именуют РНК-анализ, так как он выявляет частицы рибонуклеиновой кислоты, имеющие размер 30-60 нм, содержащиеся в флававирусе.

Исследование проводится следующим образом: натощак пациент сдает кровь из вены, которая потом тестируется разными методами:

Real-Time PCR проводится закрытым автоматизированным способом и имеет нижний лимит выявления вируса РНК, равный 15 МЕ/мл;
COBAS AMPLICOR с сенситивностью 50-100 МЕ/мл.

Чем выше порог чувствительности у диагностической методики, тем больше шансов обнаружить самое минимальное содержание вируса в исследуемом биологическом материале.

Какие разновидности анализа используют

Анализ, успешно применяемый уже несколько десятков лет называется ПЦР гепатит при этом выявляется достаточно просто и быстро. В медицине различают две методики проведения реакции, принципиально отличающиеся друг от друга:

качественный метод выявляет наличие в биологическом материале генетического источника определенного вируса;
количественный анализ измеряет число генетической материи, позволяющее определить стадию патологии или оценить эффективность проводимого терапевтического курса;
генотипирование определяет тип вируса, присутствующего в организме.

В целом анализ крови помогает выявить характер вирусемии и генетический тип возбудителя. Как правило, исследование проводится 1 раз в зависимости от степени чувствительности диагностической системы. При необходимости проводят повторное тестирование, используя ультрачувствительный реагент.

Качественный ПЦР

Что такое качественный ПЦР РНК на гепатит С? Суть реакции заключается в присутствии последовательности РНК гепатита, причем выполнение реакции возможно лишь в случае присутствия вирусных белков схожей этимологии в ИФА. В процессе сравнения выявляется нагрузка и возможное поражение области печени.

Отличительной особенностью данного метода является способность выявить даже наличие отдельного гена.

Следует отметить, что после получения результатов исследования ПЦР и ИФА, пациенту требуется соответствующее лечение, независимо от того, каким оказался итоговый иммуноферментный результат. Положительный свидетельствует об инфицировании, а ПЦР отрицательный — о сниженном количестве вирусных частиц относительно уровня чувствительности.

Существует несколько условий, влияющий на получение отрицательного показателя ПЦР и ИФА:

отсутствие соответствующих условий забора материала;
в полученном анализе присутствуют загрязнения;
в случае раннего введения пациенту инъекций гепарина.

Со стороны больного не требуется соблюдения определенных правил по забору крови на ПЦР анализ, в данном случае качество этого анализа зависит от медицинского работника, проводящего процедуру. Возможность установить присутствие заболевания (особенно в острой форме) появляется уже через несколько недель после инфицирования.

Количественный анализ

Количественный тест рекомендуется проводить для выявления вирусной нагрузки непосредственно перед формированием дальнейшей терапии и реакцией организма. Процесс забора крови проводится аналогичным образом, что при качественном ПЦР и ИФА, единственным условием является отсутствие возможности курения пациента перед процедурой.

Что касается характеристики полученных в результате изучения данных, то повышенная нагрузка характеризуется показателями от 800000 МЕ/мл, низкий — 400000 МЕ/мл. О присутствии вируса в организме пациента говорит ПЦР на гепатит не отрицательный качественный тест.

Подобного рода исследование дает возможность определить, насколько пациент опасен для окружающих его людей. Так, например, выявление высокого уровня говорит о повышенной заразности пациента. К тому же результаты анализа помогают сформировать дальнейшее наиболее эффективное лечение и определить, на сколько имеющаяся терапия считается действенной.

Быстрый отрицательный ответ тестов говорит об успешности выбранной методики, а медленное — о необходимости корректировки и использования разностороннего лечения.

Процесс проведения процедуры взятия анализа зависит от определенного дня течения заболевания. Первое определение проводится в первые сутки после поступления пациента в стационар, далее процедура повторяется на 4, 12 и 24 неделе после того, как был начат прием лекарственных средств.

Таким образом, количественный анализ показывает, какое лечение является наиболее эффективным, длительность имеющейся терапии и опасность пациента по отношению к другим людям.

Генотипирование

При исследовании материала анализа важно определить точность того генотипа вируса, который имеет место быть. В настоящее время существует 11 разновидностей вируса гепатита С, которые в свою очередь включают в себя определенные подвиды.

Все эти виды по-разному реагируют на различные способы лечения, при этом отдельные разновидности абсолютно устойчивы ко многим лекарственным препаратам.

Генотип дает возможность определить и показать состояние печени. Нередки случаи, когда в результатах записывается «не типируется», что означает, что вирус, находящийся в крови пациента не определяется данной тестовой системой. Подобное может быть выявлено в случае, если определенный генотип не соответствует данной зоне. В подобной ситуации забор анализа осуществляется повторно, при этом для исследования материала используется более чувствительная система.

Ультрачувствительный метод

Ультрачувствительный метод необходим в определенных случаях, когда диагностика гепатита не может осуществляться посредством других методов, при этом, когда сдавать анализ определяется лечащим врачом:

при подозрении присутствия вируса гепатита С у больных, имеющих скрытую разновидность заболевания;
присутствие антител относительно вируса гепатит С, не подтвержденный ПЦР-диагностикой;
с целью определения качества эффективности выбранной методики лечения, и подтверждения факта устранения заболевания.

Чувствительность данного метода значительно выше тех, которые обычно применяются, однако и этот метод не исключает получение ложных результатов, причем как положительных, так и отрицательных. В подобной ситуации важно контролировать качество проведения процедуры и возможность загрязнения самого материала.

Расшифровка анализа ПЦР

Расшифровка анализа проводится на основе представленных материалов, при этом в результаты лабораторных исследований включаются определенные данные, описанные выше.

Расшифровка может включать в себя выявление в анализе положительный ПЦР полимеразной цепной реакции и отрицательного значения ИФА значит, что у пациента в крови отсутствуют признаки гепатита С, однако в прошлом он перенос острую форму данного заболевания. Как правило, при диагностике специалисты прибегают к использованию именно показателей тестов ПЦР.

Подводя итог всему вышесказанному, можно сделать вывод о том, что при проведении анализа важно соблюдать все правила и рекомендации, чтобы полученные результаты были максимально точными, а на основе полученных данных можно было определить эффективность использующейся терапии и дальнейший шанс на полное выздоровление.

krov.expert

Перечень необходимых исследований

Какие анализы нужно сдать при гепатите С? Для точной диагностики болезни, выявления ее причин и определения состояния паренхимы печени требуется выполнение таких исследований:

общего анализа мочи и крови;
биохимического анализа крови;
анализа методом ПЦР;
анализа крови на выявление антител к HVC;
анализа крови на имеющиеся антитела к собственным печеночным клеткам;
биопсии печени.

Расшифровка анализа крови на гепатит С выполняется специалистом. Рассмотрим каждый способ исследования подробнее, а также разберемся какой анализ на гепатит С самый точный.

Общий анализ

При выполнении общего анализа крови при гепатите С можно оценить состояние пациента. Изменения показателей крови не воспринимаются, как специфические симптомы гепатита, однако при данном заболевании происходят такие нарушения, как:

снижается концентрация гемоглобина, тромбоцитов и лейкоцитов;
повышается содержание лимфоцитов;
нарушается свертываемость крови;
увеличивается скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Общий анализ мочи дает возможность обнаружить в ее составе уробелин — желчный пигмент, возникающий в моче в результате нарушения функционирования печени.

Биохимический анализ

Биохимический анализ крови при гепатите С позволяет выявить такие нарушения, как:

повышено содержание ферментов печени (аланинтрансаминазы — АЛТ и аспартатаминотрансферазы — АСТ), которые поступают в кровь при повреждении гепатоцитов. В нормальном состоянии данные показатели у мужчин не должны быть более 37 МЕ/л, у женщин — не выше 31 МЕ//л. Повышенная концентрация АЛТ и АСТ при гепатите С, протекающем бессимптомно, часто является единственным симптомом данного заболевания. Кроме этого, в составе крови увеличивается уровень глутамилтранспептидазы щелочной фосфатазы (в норме не выше 150 МЕ/л).
содержание билирубина (как общего, так и прямого) в крови превышено. Если уровень желтого пигмента в сыворотке крови превышает 27-34 мкмоль/л, возникает желтуха (до 80 мкмоль/л в легкой форме, 86-169 мкмоль/л — в среднетяжелой, выше 170 мкмоль/л — в тяжелой форме).
Понижен уровень альбуминов, концентрация гамма-глобулинов, наоборот, повышена. Гамма-глобулины состоят из иммуноглобулинов — антител, которые защищают организм от болезнетворных веществ.
увеличена концентрация триглицеридов в составе крови.

Исследование ПЦР

При помощи методики ПЦР можно диагностировать возбудителя болезни. Выполнение этого анализа дает возможность обнаружить в составе крови вирус, даже если количество его минимально. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет определить в крови имеющуюся инфекцию уже по прошествии 5 дней с момента заражения, то есть задолго до того, как появятся антитела.

Если результат анализа крови на гепатит С методом ПЦР положительный, это говорит о присутствии активной инфекции в организме. При помощи данного метода можно провести качественное и количественное исследование РНК HVC.

Такую диагностическую процедуру выполняют в том случае, если в крови выявлены анти-HVC.

Расшифровка анализа на гепатит С содержит информацию о том, что в организме инфекция или выявлена, или не выявлена. В нормальном состоянии патологические вещества в составе крови не обнаруживаются.

Если анализ на гепатит С дает положительный результат, это говорит о том, что патогенный микроорганизм непрерывно делится и поражает печеночные клетки.

Результаты такого анализа могут оказаться недостоверными, это возможно в следующих случаях:

при загрязнении используемого биоматериала;
при наличии в крови гепарина;
при наличии химических или белковых субстанций (ингибиторов) в исследуемом биоматериале, влияющих на элементы ПЦР.

Количественный анализ на гепатит С дает информацию о количестве вируса, содержащегося в крови, то есть определяет вирусную нагрузку. Под данным понятием подразумевается объем РНК HVC, присутствующий в крови (например, в 1 мл). В расшифровке количественного анализа на гепатит С это значение выражено в цифровом эквиваленте, измеряется в МЕ/мл.

Кровь на ПЦР при гепатите С сдают перед проведением терапевтических мероприятий. После анализ выполняют на 1, 4, 12 и 24 неделях. Исследование на 12 неделе является показательным и выполняется с целью оценки эффективности проводимых лечебных процедур.

Если анализ на гепатит С при беременности положительный и при этом значения вирусной нагрузки превышены, то риск передачи болезнетворных микроорганизмов от больной матери к ребенку увеличивается в несколько раз. Также при повышенных значениях вирусной нагрузки осуществление лечебных мероприятий затруднительно.

Согласно расшифровке анализов на гепатит С, если значения вирусной нагрузки превышают 800 000 МЕ/мл, то она является высокой. Если показатели ниже 400 000 МЕ/мл, уровень вирусной нагрузки считается низким.

Анализ на гепатит С методом ПЦР считается самым точным и обладает рядом преимуществ перед другими вариантами исследований, а именно:

прямая диагностика возбудителя болезни. При выполнении традиционных исследований определяются наличие белковых маркеров, являющихся продуктами жизнедеятельности болезнетворных веществ. Это говорит только о том, что инфекция присутствует в крови. При сдаче анализа на гепатит С методом ПЦР возможно определить вид возбудителя опасной патологии.
специфичность методики. В ходе такой процедуры в биоматериале определяется уникальный участок ДНК, соответствующий лишь одному типу возбудителя. Это позволяет минимизировать вероятность получения недостоверных результатов.
высокая чувствительность. При выполнении ПЦР-анализа можно обнаружить минимальное количество вируса. Это важно, если выявляются условно-патогенные вещества, представляющие угрозу только в случае повышения их уровня.
при использовании такой методики в одном образце биоматериала можно выявить сразу несколько возбудителей.
можно обнаружить скрыто протекающие инфекции. Помимо этого, анализ позволяет диагностировать болезнетворные микроорганизмы, обитающие внутри клеток и имеющие высокую антигенную изменчивость.

Отрицательный анализ ПЦР на гепатит С означает, что следы инфекции в биоматериале отсутствуют.

Иммунологическое исследование

Данный способ позволяет определить антитела ко всем видам вируса гепатита, а также антитела к печеночным клеткам собственного организма, возникновению которых способствует развитие аутоиммунного гепатита.

Результаты, полученные в ходе исследования, актуальны на протяжении 3 месяцев, затем следует повторно сдавать кровь на гепатит С.

Возможно также выполнение экспресс-исследования с применением специальных тестовых полосок. Данный анализ дает возможность определить в составе крови и слюны антитела к вирусу С. Такую процедуру можно осуществить самостоятельно, на дому.

Биопсия печени

Для выполнения такого анализа берут элемент паренхимы печени и выполняют гистологическое исследование полученного биоматериала. Это позволяет оценить состояние органа: выявить воспалительные, некротические очаги, стадию фиброза и прочее.

Для оценки стадии поражения печени и интенсивности процесса воспаления применяют специфические биомаркеры венозной крови. С помощью Фибротеста можно оценить степень разрастания фиброзной ткани.

При выполнении Актитеста можно получить информацию об интенсивности патологических процессов в паренхиме печени. С помощью Стеатотеста можно диагностировать жировое перерождение ткани печени и оценить степень этого процесса. Фибромакс состоит из всех вышеуказанных тестов и может включать в себя некоторые другие исследования.

Подготовка к проведению исследования

Какие анализы сдают при гепатите С и как выполняется тот или иной вид исследования мы выяснили. Не менее важно знать, как нужно подготовиться к проведению анализа.

Для получения достоверных результатов рекомендуется придерживаться следующих требований:

анализы при гепатите С необходимо сдавать в утренние часы, на голодный желудок. Последний раз пищу следует употреблять минимум за 8 часов до выполнения исследования.
Забор биоматериала можно осуществлять и в дневное или вечернее время. В таком случае важно, чтобы между последним приемом пищи и выполнением анализа прошло не меньше 5-6 часов.
перед сдачей крови на гепатит С следует отказаться от чая, кофе, сока или других напитков, разрешена только вода.
за 48 часов до проведения исследования необходимо исключить употребление жирных, жареных продуктов и спиртсодержащих напитков.
на протяжении минимум часа до выполнения анализа нужно воздержаться от табакокурения.
не следует выполнять анализ сразу после проведения ультразвукового, инструментального, рентгенологического обследования, сеанса массажа или физиотерапии.
за сутки до осуществления исследования требуется исключить прием медикаментозных средств и интенсивную физическую активность. Эмоциональные нагрузки также противопоказаны.
15 минут перед выполнением исследования рекомендуется провести в спокойном состоянии.

Проведение процедуры забора крови

Где сдать анализ на гепатит С? Забор биоматериала для дальнейшего исследования проводится в лаборатории медицинского учреждения или же на дому у пациента.

Кровь из вены берут следующим образом:

при помощи специального жгута, обернутого вокруг предплечья больного, приостанавливается венозный кровоток. Благодаря таким манипуляциям вены наполнятся кровью и будут более заметными, что значительно облегчит процесс введения иглы.
участок кожи, куда будет вводиться игла, тщательно обрабатывается спиртом или спиртсодержащей жидкостью.
в вену осторожно вводится игла, затем к ней прикрепляется пробирка, специально предназначенная для сбора крови.
сразу после того, как игла введена в вену сдавливающий жгут снимается с руки пациента.
после того, как собран необходимый для выполнения анализа объем крови, игла плавно вынимается из вены.
к месту укола обязательно прикладывается стерильный ватный или марлевый тампон, смоченный в спирте.
для предупреждения возникновения гематомы тампон следует с некоторым усилием прижать к области введения иглы, согнуть руку в локтевом суставе и держать в таком положении несколько минут. Такие действия также помогут быстрее остановить кровь.

При условии хорошей техники внутреннего введения данная процедура абсолютно безопасна и прочти не вызывает болезненных ощущений.

В редких случаях после забора крови возможно опухание вен. Данное явление носит название «флебит». Устранить проблему поможет компресс (не горячий), прикладывать его следует к опухшим участкам кожи несколько раз в сутки.

Также могут возникать определенные проблемы, если имеется нарушение свертываемости крови. Прием аспирина, варфарина и иных средств, разжижающих кровь, может спровоцировать кровотечение. Именно поэтому перед выполнением анализа требуется отказаться от приема любых медикаментов. Если же лечение отменить нельзя, следует сообщить об этом специалисту.

Сроки и цены

Сколько делается анализ на гепатит С? Результаты исследования крови на гепатит могут быть готовы и через несколько часов, и через несколько дней (как правило, не более 8 дней). Длительность подготовки результатов зависит от вида вируса и выбранной методики анализа. Более быстрым является исследование, проводимое способом ПЦР. Результаты в этом случае будут готовы всего через несколько часов.

Следует знать, что для формирования достаточного объема антител к HVC может потребоваться несколько недель. Поэтому на раннем этапе развития патологии результат исследования может быть ложноотрицательным.

Кроме этого, получение недостоверных данных возможно при некачественном выполнении анализа и нарушении условий транспортировки полученного биоматериала (образцы должны быть доставлены в лабораторию максимум через 2 часа после забора крови).

Если результат исследования окажется положительным, необходимо незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту. Специалист проведет дополнительное обследование и назначит соответствующее лечение.

Вам все еще кажется, что вылечить гепатит С тяжело?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки – победа в борьбе с заболеваниями печени пока не на вашей стороне… И вы уже думали о интерфероновой терапии? Оно и понятно, ведь гепатит С – очень серьезное заболевание, ведь правильное функционирование печени – залог здоровья и хорошего самочувствия. Тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, потемнение цвета мочи и диарея… Все эти симптомы знакомы вам не по наслышке. Но возможно правильнее лечить не следствие, а причину?

Сегодня современные препараты нового поколения Софосбувир и Даклатасвир с 97-100% вероятностью навсегда излечат вас от гепатита C. Новейшие лекарства можно приобрести в России у официального представителя индийского фармгиганта Zydus Heptiza. Заказанные препараты доставят курьером в течение 4 дней, оплата после получения. Получить бесплатную консультацию по применению современных препаратов, а также узнать о способах приобретения вы можете на официальном сайте поставщика Zydus в России.

Читать далее >>

Автор: Юлия Барабаш

propechenku.ru

Стоимость пцр

ПЦР анализ, стоимость которого зависит от применяемых реактивов, и может составлять от 300 руб. до 5000 руб., выполняется от одних суток до недели.

Кроме метода ПЦР для выявления РНК ВГС также используется метод транскрипционной амплификации (ТМА), обладающий лучшей чувствительностью (порядка 5-10 МЕ/мл.), однако этот метод в России пока не распространен.

Как часто нужно делать ПЦР гепатита C? Обычно его проводят сразу после обнаружения антител к гепатиту C и после 4-й, 12-й, 24-й недели противовирусной терапии, а также через 24 недели после завершения ПВТ, а затем — ежегодно, в случае УВО.

Рис. 1. Пример результатов качественного ПЦР гепатита С.

Количественный анализ ПЦР (вирусная нагрузка) — это тест на концентрацию вируса (виремию) в крови. Вирусная нагрузка — это количество единиц генетического материала (вирусной РНК), которая присутствует в определенном объеме крови (обычно это 1 мл, что соответствует 1 кубическому сантиметру). Это количество выражается в цифрах, единицы измерения МЕ/мл (международные единицы на миллилитр). Количество вируса может быть отображено по-разному. Например, 1,5 млн МЕ/мл, что соответствует 1.500.000 МЕ/мл или 1.5* 10⁶ МЕ/мл. В некоторых лабораториях используются другие единицы измерения — копии/мл. Коэффициент пересчета из копий в международные единицы различный для разных тест-систем. Примерно значения можно пересчитать по формуле 1 МЕ/мл = 4 копии/мл, например, 5.5* 10⁵ МЕ/мл = 2.2* 10⁶ копий/мл.

На что же влияет вирусная нагрузка?

Во-первых, на инфекционность. Чем выше концентрация вируса, тем выше риск передать вирус, например, при половых контактах или вертикальным путем. Во-вторых, концентрация вируса влияет на эффективность лечения (если лечение будет проводиться на основе интерферона). Так, низкая вирусная нагрузка является благоприятным фактором при проведении терапии, а очень высокая – неблагоприятным. Также, количественный ПЦР имеет большое значение при проведении интерфероновой терапии для оценки ее успешности и планировании длительности курса. Так, при быстром ответе на лечение и низкой виремии перед терапией, сроки лечения могут быть сокращены. И, наоборот, при медленном снижении концентрации вируса, ПВТ может быть продлена.

Какая нагрузка считается низкой, а какая — высокой?

Высокой принято считать нагрузку свыше 800 *10³ или 800.000 ME/мл, что примерно составляет 300*10⁴ или 3.000.000 копий /мл. Нагрузка свыше 1*10⁷ ME/мл считается очень высокой. Однако до сих пор среди специалистов нет общего мнения о значениях, разграничивающих высокую и низкую виремию. Так, в некоторых работах этой границей считается цифра 400.000 ME/мл.

Как часто нужно делать количественный тест?

Обычно его делают перед проведением терапии и после 12-й недели лечения для оценки ее эффективности в случае, если качественным тестом РНК еще определяется.

Результатом количественного теста может быть количественная оценка виремии в формате, описанном выше, а также результаты «ниже диапазона измерений» и «не обнаружено».

Порог чувствительности количественного ПЦР обычно выше, чем качественного. Так, для системы COBAS AMPLICOR он составляет 600 ME/мл. Результат «не обнаружено» может означать, что количественный тест и подтверждающий качественный тест не обнаружил вирусную РНК. Результат «ниже диапазона измерений» означает, что количественный тест не выявил РНК гепатита С, но вирус присутствует в очень малой концентрации (в случае, если при этом был проведен дополнительный подтверждающий качественный тест).

Рис.2 Пример результатов количественного теста.

www.hv-info.ru

Анализ ПЦР

Сегодня диагностика гепатита С происходит при помощи иммунограммы и биопсии печени. Эти исследования помогают определить антитела в организме, которые приводят к поражению клеток печени. Но данные методы не позволяют определить наличие болезни на все 100 %. Наиболее точную информацию о наличии вируса гепатита С дает лабораторное исследование ПЦР.

Этот анализ проводится в определенных условиях, благодаря которым имеется возможность выстроить цепь РНК в биологическом материале. Происходит это из-за того, что когда организм поражает вирус, его частицы все равно попадают в кровь. И при их соединении со специальными молекулами в определенной среде начинает выстраиваться комплементарный вирусный РНК.

При его последующем исследовании удается выявить вирус гепатита С в организме и процесс разрушения печени, если он начался. Делают ПЦР только после того, как в крови пациента обнаруживаются специфические антитела, которые вырабатываются иммунной системой при поражении организма вирусом.

Как только анализ ПЦР проводится, на бланке указывается: РНК «обнаружено» или «не обнаружено». Однако в некоторых ситуациях указывается «недостаточно материала», и здесь требуется повторная сдача анализа.

Если концентрация вирусных частиц в исследуемом материале меньше минимального количества, то это указывает на отсутствие гепатита С. Однако отрицательный результат на РНК может наблюдаться и тогда, когда организм подвергся совершенно недавно заражению: частиц вируса настолько мало, что тест-система их просто не смогла обнаружить.

Если анализ РНК положительный, это свидетельствует о том, что количество вирусных частиц в исследуемом материале превышает нижний порог, что указывает на наличие инфекционного процесса. Следует отметить, что высокие показатели анализа ПЦР уже являются доказательством развития болезни и говорят о необходимости проведения лечения.

Анализ ПЦР иногда может быть ложноположительным и ложноотрицательным. Последний наблюдается тогда, когда в среде, в которой проводится исследование, находятся компоненты, подавляющие образование цепи РНК вируса. В результате этого не удается своевременно выявить гепатит, что приводит к его дальнейшему прогрессированию.

Повлиять на результат анализа может гепарин, который находится в крови пациентов. Также ошибочный результат может являться следствием несоблюдения условий транспортировки биологического материала и его хранения.

Ложный положительный результат анализа ПЦР наблюдается в том случае, если биологический материал был помещен в загрязненную пробирку либо при наличии вируса гепатита в организме, но другого типа.

На качественность результата анализа ПЦР может повлиять высокая концентрация криоглобулинов в крови. Поэтому, чтобы получить более точные ответы, рекомендуется перед анализом сдать кровь на выявление данного вещества. Это позволит заранее определить возможные искажения результатов анализа.

После того как качественный анализ ПЦР будет сделан и по итогам исследования в крови обнаружится высокая концентрация частиц вируса, пациенту назначают специфическое лечение. Однако следует понимать разницу между гепатитом В и гепатитом С. Если от первого имеется возможность вылечиться, то от второго — нет. И чаще всего он требует пересадки печени.

Количественный анализ ПЦР

Количественный анализ ПЦР дает возможность выявить частицы вируса в крови и определить степень поражения печени. Это более качественный анализ, который дает достоверные результаты. Итоги исследования выражаются в единицах измерения: количестве копий на мл (копии/мл).

Количественный анализ ПЦР проводят перед тем, как начинается лечебная терапия. Затем его проводят каждые 10–14 дней, чтобы следить за эффективностью проводимого лечения. Оценка на 12 неделе лечения является наиболее показательной.

Для проведения такого анализа не требуется какой-либо специальной подготовки. Единственное, что необходимо сделать пациенту, это, естественно, отказаться от алкоголя и курения за один-два часа до взятия биологического материала. Для данного исследования берется кровь из вены.

В разных лабораториях существуют разные значения исследований. В некоторых используются копии/мл, а в некоторых — МЕ/мл: 4 копии/мл равняются 1 МЕ/мл.

Положительным результат РНК считается в том случае, если виремия превышает 800 000 МЕ/мл или 3 000 000 копий/мл. Отрицательным ответ является, когда данные показатели не превышают порога 400 000 МЕ/мл.

При этом в бланке анализа итог проводимого исследования может быть указан не в цифрах, а в виде значения: ниже, выше нормы, не обнаружено и т. д. Значение «РНК ниже диапазона измерения» указывает на то, что частицы вируса присутствуют в исследуемом материале, но в очень маленьких количествах. Если при последующих исследованиях данные значения будут возрастать, это уже свидетельствует о прогрессировании болезни.

Если в анализе указано «РНК не обнаружено», то это говорит о том, что вирус гепатита С и других его типов отсутствует и человек здоров.

ПЦР — один из самых достоверных анализов. При помощи его можно не только выявить уже прогрессирующий гепатит, но и начальную стадию его развития, что позволяет своевременно начать лечение и предотвратить быстрое развитие патологии.

apechen.ru